第三十章 磕磕絆絆地起步

林蕭然輕輕搖頭，他已經打定主意，以後再與師姐打交道，雖可以繼續刺激對方，撩撥火氣，卻要更加慎重，像這種給自己帶來無限麻煩的事情，萬萬不能重現！

這一次他確實爽了，也獲得了自尊心點，可是收拾爛攤子也著實頭痛，好像是以本傷人，最後弄得一地雞毛。

林蕭然細胞培養的見識遠超黃薇，儘管對方看似存在刁難的意思，他也不會真正感到為難，只是稍一思慮，就想到應對之策。

「我們目前擁有的是原發細胞，培養方案亟待探索，卻不一定要設定單一目標，可以同時引入細胞膜物質運輸加以研究，如此一來，將大幅度提高實驗效率，你以為如何？」

黃薇聽罷，眼前微露光芒，口中喃喃，「課題是細胞懸浮馴化及貼壁和懸浮狀態膜運輸研究，原發細胞貼壁生長，已經可以著手研究貼壁狀態細胞膜運輸特性，待實現細胞懸浮馴化，再完成餘下實驗，可是，細胞培養條件尚未優化，火急火燎進行這一步，有意義嗎？」

「影響肯定存在，但沒有多麼嚴重，最終取得的數據仍在許可範圍之內，那點影響完全可以忽略！」

有關細胞的膜運輸，乍聽起來很高大上，弄清原理就會發現沒有多麼玄奧，簡單說來，膜運輸是指將細胞外界物質輸送至細胞內，或細胞內物質排出細胞的過程！

細胞膜控制著一切物質的進出，比如細胞生長所須的養料，要經由細胞膜進入胞內，代謝終產物同樣需要經細胞膜排至胞外，細胞膜是細胞最關鍵的屏障與門戶。

細胞膜的結構非常簡單，由兩層磷脂分子構成，中間嵌有特定蛋白，它非常薄，僅七納米左右，與高端晶元電路彷彿！

細胞膜如何控制物質進出呢？

通常情況下，絕大多數小分子，比如水、多數離子、氨基酸及維生素，可以按照細胞內外環境的濃度差，自由擴散穿過細胞膜，而鉀、鈉、鈣等重要離子及大分子，如蛋白，要通過主動運輸進入細胞。

很好理解，比如生活在大海中的魚，海水雖然很咸，魚肉含鹽量卻並不高，這就是細胞膜的功勞，限制了鹽的隨意滲入，可以說沒有細胞膜，大海將不可能存在生物。

我們一般認為，貼壁生長的細胞，膜運輸的能力弱於懸浮培養，而初始細胞均以貼壁形式生長，這也是為什麼在細胞培養中，要進行細胞的懸浮馴化，目的在於提升膜運輸效率。

「唉，提起膜運輸實驗，我的心裡就是一陣煩悶，仔細想想，又覺得你說得沒錯，這兩天看了一些相關資料，雖然還沒有仔細研究，但明白無論工作量還是實驗難度，提升了不止一個級別，以後有得苦吃嘍！」

「也不用特別擔心，因為許多實驗的重複性很強，只要熟練之後，就會發現並不是想象中那麼困難，同時，我們也要有自知之明，清楚自己的定位，研究要有選擇性，論文有說服力就好，不必追求完美，不必貪多……，否則容易撐著！」林蕭然微笑道。

「有選擇性？」黃薇微微思索，隨後拉開抽屜取出一摞文本，都是些沒有整理的初始文獻，「這是些有關維生素、氨基酸、葡萄糖和蛋白等，膜運輸方面的文獻，你覺得怎樣取捨？」

「有機的，無論小分子還是大分子，實驗室沒那個條件，舍了吧，只做溶解氧與鉀離子好了！」林蕭然早有決斷，選出兩項最容易實現的研究對象！

可供研究膜運輸效率的對象很多，無論自由擴散方式，比如水、氧氣等，或者主動運輸進入細胞的物質，如鉀、鈉、鈣及蛋白等，都可供選擇，不可否認，研究對象越多，實驗結果就越有說服力。

那麼，是否應將更多因素納入研究對象？

這麼想當然沒有問題，只可惜，條件所限，即使願望很美好，也必須慎之又慎，原因很簡單，人力物力消耗不起！

選擇溶解氧監測是因為比較容易實現，細胞培養中，利用氧電極可以輕鬆獲得溶解氧數據，再以時間為X軸溶解氧為Y軸，很容易繪製溶解氧曲線，得出結論。

但溶解氧數據相對粗放，參考性較差，很難得出我們需要的結論，只能作為輔助參考數據，與之相比，我們更關心主動運輸數據，如鉀、鈉、鈣等離子的遷移，實驗中，可以預設培養基特定離子濃度，接下來按時檢測，可以得到相應數據。

鉀、鈉、鈣等離子的檢測同樣繁瑣，大家都知道，鉀、鈉屬於鹼金屬，它們不容易形成沉澱，需要通過特殊的方法檢驗，具體過程不再贅述，總之相當繁瑣。

而鈣離子雖然容易沉澱，但它也容易絡合，檢測時，很難判定哪部分沉澱，哪部分轉化成為絡合物，同樣不易獲得有效檢測結果，不是很好的研究對象，沒有能力的情況下只能放棄。

生物反應的重現性比較差，加之實驗條件簡陋，每一項數據會呈現較大的發散性，若選取研究對象太多，黃薇很難在畢業前得出有效結論，最現實的做法是儘可能精簡實驗，如此一來，論文雖然不是多麼好看，最起碼不會影響畢業。

黃薇的性格是很傲氣的，加之也翻閱了一些資料，有了一定見識，可是以她那點可憐的知識儲備，在小師弟林蕭然面前，依然無法提出多少反對意見，多數時候都在木然點頭。

做通了黃薇的工作，接下來的事情就簡單了，他們很快進入實驗討論環節，也算不上討論，因為多數情況下都是林蕭然在說，黃薇在聽。

細胞實驗說起來簡單，真正準備起來也相當繁瑣，簡而言之，實驗準備工作可以分為兩部分。

其一是材料，關鍵是細胞，細胞已經到手，但試劑、設備等也不容忽視，任何一項出現紕漏，都會影響實驗的進展。

試劑也不是那麼簡單，比如培養基，細胞培養基與微生物培養基存在著顯著的差異，配方之類不提，單純滅菌過程就完全不同。

微生物的滅菌，通常採用高壓滅菌鍋，121℃、15分鐘即可，非常簡單，但細胞培養基就比較麻煩，只因許多成分不耐高溫，只能採取過濾方法隔離雜菌。

細胞培養基的準備，過濾同樣至關重要！

另外，細胞培養所需的條件也有別於微生物培養，它需要使用二氧化碳培養箱，而二氧化碳要提前到器材科領取！

細胞培養基所需的牛血清和各種維生素等，器材科肯定沒有，不急的話可以在器材科報備，等它採購，但是器材科的辦事效率低到讓你懷疑人生，好吧，最好自己聯繫商家直接購買！

檢測同樣需要大量試劑，都需要準備妥當，否則實驗開始了，卻又發現短缺某些試劑，到時候只有哭的份兒了，無法檢測，就意味著實驗白做！

實驗方法同樣關鍵，實驗方法也是對實驗過程的描述，它的存在不僅可以規範實驗，還可以在一定範圍內發現其中疏漏，實驗步驟描述得越詳實，出現疏漏的機率就越低。

材料方面此時肯定無法處理，兩人開始起草實驗方法，起草工作由黃薇一人承擔，這也是林蕭然特彆強調的，實驗是她的實驗，從頭到尾應該由她一人完成！

林蕭然也沒閑著，他趁此功夫打開電腦，開始按照腦海中的記憶，查詢起生物試劑供應商的聯絡方式。

他在美津供職八年，在試劑小組工作，對於市場主流生物製劑供應商非常熟悉，查找起來相當輕鬆。

不多時，一家家比較靠譜的試劑供應商，出現在屏幕，林蕭然擇重點記了下來。

也許黃薇發現小師弟太好用了，用起來沒有一點心理負擔，因此，問題一個接著一個！

「蕭然，過濾好像需要氣泵，我們實驗室沒有啊，其他教研室倒是有，但設備太大，不方便借來吧！」黃薇望看向林蕭然，茫然問道。

「用不上氣泵，水抽子就行，那玩藝兒足夠用！」林蕭然側過頭，答道。

「蕭然，我們要用三角瓶嗎？可是我們沒有二氧化碳搖床，溶解氧怎麼解決？」

「知道我們沒有二氧化碳搖床，就不搖了唄，用二氧化碳培養箱將就一下，溶解氧低的問題……，直接用平皿培養吧，增養基液較淺，有利於氧交換，同時還可以節省培養基，那東西挺貴的，省得陸老闆心疼。」

「在平皿裡面……，放液體培養基？沒有這樣做過啊，感覺挺新鮮，能行嗎？」

……

「蕭然，查資料的時候發現，有些培養基配方用到牛血清，有些卻沒有，為什麼啊？」

「在申請臨床批文階段，細胞基因重組表達抗體蛋白時，不允許培養基出現牛血清成分！」

「到底採用哪種配方呢？」

「我們只是做細胞懸浮馴化！」

「也就是可以使用牛血清配方？」

「……」林蕭然。

時間一分一秒過去，近兩個小時，實驗方法尚未完全縷清，但沒關係，明天還可以繼續完善，關鍵是，黃薇終於停下了手頭工作。

林蕭然長長呼出一口氣，暗嘆，師姐不發怒的時候，同樣麻煩！